Spas ji bo serdana Nature.com.Guhertoya geroka ku hûn bikar tînin piştgirîya CSS-ê sînordar e.Ji bo ezmûna çêtirîn, em pêşniyar dikin ku hûn gerokek nûvekirî bikar bînin (an jî Moda Lihevhatinê ya di Internet Explorer de neçalak bikin).Di vê navberê de, ji bo misogerkirina piştgirîya domdar, em ê malperê bê şêwaz û JavaScript pêşkêş bikin.
Fotosensitîzatorên bi bandor bi taybetî ji bo karanîna klînîkî ya berfireh a fototerapiyê girîng in.Lêbelê, fotosensîtîzatorên kevneşopî bi gelemperî ji vegirtina dirêjahiya pêlê ya kurt, îstîqrara ne têr, hilberîna quantum a kêm a cureyên oksîjena reaktîf (ROS) û qutkirina ROS-ê ya ji ber kombûnê dikişînin.Li vir em wênesazkerek supramolekular a nêzê-infrared (NIR) (RuDA) radigihînin ku bi navbeynkariya xwe-kombûna kompleksên organometalîk ên Ru (II) -arene di çareseriya avî de pêk tê.RuDA tenê dikare di rewşa berhevkirî de oksîjena yekalî (1O2) biafirîne, û ew behreya nifşa 1O2 ya ku ji berhevbûnê ve hatî çêkirin eşkere nîşan dide ji ber zêdebûnek girîng di pêvajoya xaçerê de di navbera pergala yek-sê-sê de.Di bin çalakiya ronahiya lazerê ya 808 nm de, RuDA hilbera kuantûmê ya 1O2 ya 16,4% (pejirandina kesk-indocyanine ya FDA: ΦΔ = 0,2%) û karîgeriyek veguherîna fototermal a bilind a 24,2% (nanorodên zêr ên bazirganî) bi wênesaziya hêja nîşan dide.: 21,0%, nanokên zêr: 13,0%).Wekî din, RuDA-NP-yên bi biyolojîkî yên baş dikarin bi bijartî li cîhên tumorê kom bibin, ku di dema terapiya fotodînamîkî de bi kêmkirina 95.2% di hêjmara tumorê de di vivo de dibe sedema paşveçûnek girîng a tumorê.Ev tedawiya fotodînamîkî ya ku kombûnê zêde dike stratejiyek ji bo pêşxistina hestiyarkerên bi taybetmendiyên fotofizîkî û fotokîmyayî yên bijarte peyda dike.
Li gorî tedawiya kevneşopî, terapiya fotodînamîk (PDT) ji ber avantajên wê yên girîng ên wekî kontrolkirina cîhê-demî ya rast, ne-dagirkerî, berxwedana dermanê neguhezbar, û kêmkirina bandorên alîgir 1,2,3, dermankirinek balkêş e ji bo penceşêrê.Di bin tîrêjkirina ronahiyê de, fotosensitîzatorên ku têne bikar anîn dikarin werin çalak kirin da ku celebên oksîjenê yên pir reaktîf (ROS) ava bikin, ku bibe sedema apoptosis / necrosis an bersivên parastinê4,5. Lêbelê, piraniya fotosensitîzatorên kevneşopî, wekî klorîn, porfîrîn, û anthraquinones, xwedan pêlên pêl kêm in (frekansa < 680 nm), ji ber vê yekê ji ber vegirtina zexm a molekulên biyolojîkî (mînak, di hemoglobîn û melanîn) de, ketina ronahiyê kêm dibe. herêma xuya6,7. Lêbelê, piraniya fotosensitîzatorên kevneşopî, wekî klorîn, porfîrîn, û anthraquinones, xwedan pêlên pêl kêm in (frekansa < 680 nm), ji ber vê yekê ji ber vegirtina zexm a molekulên biyolojîkî (mînak, di hemoglobîn û melanîn) de, ketina ronahiyê kêm dibe. herêma xuya6,7. Однако большинство обычных фотосенсибилизаторов, таких как хлорины, порфирины и антрахиноны, обладают относительно коротковолновым поглощением (частота < 680 нм), что приводит к плохому проникновению света из-за интенсивного поглощения биологических молекул (например, гемоглобина и меланина) в видимая область6,7. Lêbelê, piraniya fotosensitîzatorên gelemperî yên wekî klorîn, porfîrîn û antraquinones xwedan dirêjahiya pêlê ya nisbeten kurt (<680 nm) ne û di encamê de ronahiyek nebaş ji ber vegirtina zexm a molekulên biyolojîkî (mînak hemoglobîn û melanîn) di nav devera xuyayî de6,7.然而, 大多数 传统 的 光敏剂, 如 二 氢, 卟啉 和 蒽醌, 具有 相对 较 较 的 波长 相对 相对 相对 相对 相对 相对 相对 相对 相对 相对 相对 相对 相对 相对 相对 相对 相对 (频率 <680 NM), 因此 由于 对 生物 黑色素 生物 的 强烈 吸收) 的 强烈 吸收 吸收,导致光穿透性差.然而, 大多数 传统 的 光敏剂, 二二 卟酚, 卟啉卟啉, 具有 相对 较 短 的 波长 波长 波长 吸收 波长 波长 波长 分子 分子 分子 分子 分子 分子 分子 分子 分子 分子 分子 分子 分子 分子 分子 分子 的 由于 分子 分子吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 HI导致光穿透性差。 Ji bo tradîsyonên fotosensîbilizatoran, wek hlorînы, borfirînы û antrahînonы, navên относительно гломазые глощение (частота < 680 nm) ji-за сильного и гломохольночение. Lêbelê, piraniya wênesazkerên kevneşopî yên wekî klorîn, porfîrîn û anthraquinones ji ber vegirtina xurt a biomolekulên wekî hemoglobîn û melanîn ku di encamê de ketina ronahiyê kêm dibe, xwedan pêla dirêjahiya pêlê bi nisbeten kurt in (frekansa < 680 nm).Qada xuya 6.7.Ji ber vê yekê, fotosensîtîzatorên ku di 700-900 nm "pencereya dermankirinê" de têne çalak kirin, ji bo fototerapiyê baş in.Ji ber ku ronahiya infrasor ya nêzîk ji hêla tevnvîsên biyolojîkî ve herî kêm tê kişandin, ew dikare bibe sedema ketina kûrtir û kêm zirara wêneyê8,9.
Mixabin, fotosensitîzatorên heyî yên NIR-vegirtinê bi gelemperî xwedan wênesaziya qels, kapasîteya hilberînê ya oksîjena yekta (1O2) kêm, û qutkirina 1O2-a ji berhevbûnê ye, ku serîlêdana wan a klînîkî sînordar dike10,11.Her çend hewildanên mezin hatine kirin ji bo baştirkirina taybetmendiyên fotofizîkî û fotokîmyayî yên fotosensitîzatorên kevneşopî, heya nuha gelek rapor hatine ragihandin ku fotosensitîzatorên NIR-vekêşker dikarin van hemî pirsgirêkan çareser bikin.Digel vê yekê, gelek hestiyarker ji bo hilberîna bikêrhatî ya 1O212,13,14 dema ku bi ronahiya jorîn 800 nm were tîrêj kirin, soz dane, ji ber ku enerjiya fotonê li herêma nêzîk-IR bi lez kêm dibe.Triphenylamine (TFA) wekî donatorek elektronîkî û [1,2,5]thiadiazole-[3,4-i]dipyrido[a,c]phenazine (TDP) wekî komek elektronek qebûlker Donor-qebûrker (DA) celebek çînek rengîn dike. rengên rengan, ku nêzî infrasorê vedihewîne, ku ji ber bandgapa wan a teng, ji bo biyowêjeya biyîneya nêzê-infrasor II û terapiya fototermal (PTT) bi berfirehî hatine lêkolîn kirin.Ji ber vê yekê, rengên celebê DA-yê dikarin ji bo PDT-ê bi heyecana nêzîk-IR-ê re bêne bikar anîn, her çend ew kêm kêm wekî fotosensitîzatorên PDT-ê hatine lêkolîn kirin.
Baş tê zanîn ku karbidestiya bilind a derbaskirina navpergalê (ISC) ya fotosensitîzatoran avakirina 1O2 pêşve dike.Stratejiyek hevpar a ji bo pêşdebirina pêvajoya ISC ev e ku bi danasîna atomên giran an perçeyên organîk ên taybetî ve girêdana spin-orbit (SOC) ya fotosensitîzatoran zêde bike.Lêbelê, ev nêzîkatî hîn jî hin dezawantaj û kêmasiyên xwe hene19,20.Di van demên dawî de, xwe-kombûna supramolekular ji bo çêkirina materyalên fonksiyonel ên di asta molekulî de nêzîkatiyek hişmend a jêrîn-jor peyda kiriye, 21,22 bi gelek avantajên di fototerapiyê de: (1) fotosensitîzatorên xwe-civandî dibe ku xwedan potansiyela avakirina strukturên ribbonê bin.Dişibin strukturên elektronîkî yên ku bi dabeşkirina astên enerjiyê zexmtir e ji ber rêgezên li hev di navbera blokên avahiyê de.Ji ber vê yekê, hevahengiya enerjiyê ya di navbera rewşa heyecana yekalî ya jêrîn (S1) û dewleta dilşewat a cîranê ya sêqat (Tn) de dê baştir bibe, ku ji bo pêvajoya ISC 23, 24 sûdmend e.(2) Civîna supramolekular dê rehetiya ne-radyatîf li ser bingeha mekanîzmaya sînorkirina tevgera intramolecular (RIM) kêm bike, ku di heman demê de pêvajoya ISC 25, 26 jî pêşve dike.(3) Meclîsa supramolekular dikare molekulên hundurîn ên monomerê ji oksîdasyon û hilweşandinê biparêze, bi vî rengî îstîqrara wênekêşkerê pir çêtir dike.Ji ber avantajên jorîn, em bawer dikin ku pergalên fotosensitizer ên supramolekular dikarin alternatîfek sozdar bin ku kêmasiyên PDT derbas bikin.
Kompleksên bingehîn ên Ru (II) ji ber taybetmendiyên wan ên biyolojîkî yên bêhempa û balkêş 28,29,30,31,32,33,34 ji bo serîlêdanên potansiyel ên di teşhîs û dermankirina nexweşiyan de platformek bijîjkî ya hêvdar in.Digel vê yekê, pirbûna rewşên heyecan û taybetmendiyên fotofizîkî-kîmyayî yên birêkûpêk ên kompleksên bingehîn ên Ru (II) ji bo pêşkeftina wênesazkerên bingehîn ên Ru (II)35,36,37,38,39,40 avantajên mezin peyda dikin.Nimûneyek berbiçav kompleksa polypyridyl ruthenium (II) TLD-1433 e, ku naha di ceribandinên klînîkî yên Qonaxa II de ye wekî wênesazkerek ji bo dermankirina kansera mîzdankê ya ne-masûlke (NMIBC)41.Wekî din, kompleksên organometalîkî yên ruthenium (II)arene bi berfirehî wekî kemoterapî ji bo dermankirina penceşêrê têne bikar anîn ji ber toksiya wan a kêm û hêsankirina guhartinê42,43,44,45.Taybetmendiyên îyonî yên kompleksên organometalîkî yên Ru (II) -arene ne tenê dikarin çareserbûna nebaş a kromoforên DA-yê di halên hevpar de baştir bikin, lê di heman demê de kombûna kromoforên DA jî baştir bikin.Wekî din, avahiya nîv-sandwîç a pseudooctahedral ya kompleksên organometalîk ên Ru (II) -arene dikare bi rengek sterîkî pêşî li kombûna H-ya kromoforên celebê DA bigire, bi vî rengî avakirina kombûna J-ê bi bandên veguheztina sor ve hêsantir dike.Lêbelê, dezawantajên xwerû yên kompleksên Ru (II) -arene, wek îstîqrara kêm û / an jî peydabûna nebaş, dikare bandorê li ser bandoriya dermankirinê û çalakiya in vivo ya kompleksên arene-Ru (II) bike.Lêbelê, lêkolînan destnîşan kir ku van kêmasiyan dikarin bi vegirtina kompleksên ruthenium bi polîmerên biyolojîkî ve bi vegirtina laşî an berhevkirina covalent ve werin derbas kirin.
Di vê xebatê de, em kompleksên DA-hevgirtî yên Ru (II) -arene (RuDA) bi tetikek NIR re bi navgînek hevrêzek di navbera kromofora DAD û beşa Ru (II) -arene de radigihînin.Kompleksên ku di encamê de têne çêkirin dikarin ji ber têkiliyên ne-kovalentî di nav avê de vezîkulên metalosupramolecular bixwe bicivin.Nemaze, meclîsa supramolekular RuDA bi taybetmendiyên derbaskirina navpergalê ya ku ji hêla polîmerîzasyonê ve hatî çêkirin vekir, ku bi girîngî kargêriya ISC zêde kir, ku ji bo PDT-ê pir bikêr bû (Hêjî. 1A).Ji bo zêdekirina kombûna tumor û biyolojiya di vivo de, Pluronic F127 (PEO-PPO-PEO) pejirandî ya FDA-ê hate bikar anîn da ku RuDA47,48,49 vehewîne da ku nanopartîkên RuDA-NP (Wêne 1B) biafirîne ku wekî PDT / Dual- pir bi bandor tevdigere. moda PTT proxy.Di fototerapiya penceşêrê de (Wêne 1C), RuDA-NP ji bo dermankirina mêşên tazî bi tumorên MDA-MB-231 ve hate bikar anîn da ku bandora PDT û PTT di vivo de lêkolîn bike.
Nîşana şematîkî ya mekanîzmaya fotofizîkî ya RuDA di formên monomerîk û berhevkirî de ji bo fototerapiya penceşêrê, senteza B RuDA-NP û C RuDA-NP ji bo PDT û PTT-a-aktîfkirî ya NIR.
RuDA, ku ji fonksiyonên TPA û TDP pêk tê, li gorî prosedûra ku di Figure 1-ê de hatî xuyang kirin (Wêne 2A) de hate amade kirin, û RuDA ji hêla spektrên 1H û 13C NMR, spektrometriya girseyî ya ionîzasyona elektrospray, û analîza elementan ve hate destnîşan kirin (Wêneyên Pêvek 2-4 ).Nexşeya cûdahiya tîrêjiya elektronê ya RuDA ya veguheztina yekdestê ya herî nizm ji hêla teoriya fonksiyonê ya dendikê ve-girêdayî (TD-DFT) ve hate hesibandin da ku pêvajoya veguheztina barkirinê lêkolîn bike.Wekî ku di xêza Pêvek 5 de tê xuyang kirin, dendika elektronê bi giranî ji trifenîlamine berbi yekîneya pejirandî ya TDP ve diçe piştî wênekêşkirinê, ku dikare ji veguheztinek barkêşiya navmalekular (CT) ya tîpîk ve were veqetandin.
Struktura kîmyayî ya kanzayê B Spektrên vegirtinê yên kanzayê di têkeliyên rêjeyên cihêreng ên DMF û avê de.C Nirxên vegirtinê yên normalkirî yên RuDA (800 nm) û ICG (779 nm) li gorî demê li 0,5 W cm-2 ya ronahiya lazerê ya 808 nm.D Di bin bandora tîrêjên lazerê yên bi dirêjahiya pêla 808 nm û hêzek 0,5 W/cm2 de, wênehilweşîna ABDA bi avabûna 1O2-ya ku ji hêla RuDA ve hatî çêkirin di nav tevliheviyên DMF/H2O yên bi naverokên avê yên cihêreng de tê destnîşan kirin.
Kurt — Spektroskopiya vegirtinê ya dîtbar a UV-ê hate bikar anîn da ku taybetmendiyên xwe-sazkirinê yên Ore di tevliheviyên DMF û avê de di rêjeyên cihêreng de lêkolîn bike.Wekî ku di jimarê de tê nîşandan.2B, RuDA di DMF de ji 600 heta 900 nm bandên vegirtinê bi 729 nm band vegirtinê ya herî zêde nîşan dide.Zêdebûna mîqdara avê bû sedema veguheztina hêdî ya sor a herî zêde vegirtina Ore berbi 800 nm, ku ev yek yekbûna J-ê ya Ore di pergala berhevkirî de destnîşan dike.Spektrên fotoluminescence yên RuDA yên di halên cihêreng de di xêza Pêvek 6 de têne xuyang kirin. Xuya ye ku RuDA ronahiya NIR-II ya tîpîk bi dirêjahiya pêlê ya herî zêde ya bi qasî cayê nîşan dide.1050 nm li CH2Cl2 û CH3OH, bi rêzê.Veguheztina mezin a Stokes (nêzîkî 300 nm) ya RuDA di geometrîya rewşa heyecanê de guhertinek girîng û pêkhatina dewletên heyecan ên kêm-enerjî nîşan dide.Hilberîna quantuma luminescence ya Ore di CH2Cl2 û CH3OH de bi rêzdarî 3,3 û 0,6% hate destnîşankirin.Lêbelê, di tevliheviya metanol û avê de (5/95, v/v), sorbûnek sivik a belavbûnê û kêmbûna hilberîna kuantumê (0,22%) hate dîtin, ku dibe ku ji ber xwe-kombûna Ore be. .
Ji bo dîtina xwe-kombûna ORE-ê, me mîkroskopiya hêza atomê ya şil (AFM) bikar anî da ku piştî lê zêdekirina avê guheztinên morfolojîk ên di ORE-ê de di çareseriya metanolê de xuya bike.Dema ku naveroka avê di binê 80% de bû, ti kombûnek zelal nehat dîtin (Pêvek. 7).Lêbelê, bi zêdebûna naveroka avê ya ji sedî 90-95% re, nanoparçeyên piçûk derketin holê, ku ev yek xweserbûna Ore nîşan dide. Wekî din, tîrêjiya lazerê ya bi dirêjahiya pêlê 808 nm bandor li şiddegirtina RuDA ya di avê de nekiriye. çareserî (Hêjîrê. 2C û Pêvek. 8).Berevajî vê, vegirtina kesk a indocyanine (ICG wekî kontrol) bi lez li 779 nm daket, ku wênesaziya hêja ya RuDA destnîşan dike.Wekî din, îstîqrara RuDA-NPs di PBS de (pH = 5.4, 7.4 û 9.0), 10% FBS û DMEM (glukozek bilind) di demên cihêreng de ji hêla spektroskopiya vegirtinê ya UV-dîtbar ve hate lêkolîn kirin.Wekî ku di xêza Pêvek 9 de tê xuyang kirin, guheztinên sivik di bandên vegirtina RuDA-NP de di PBS de di pH 7.4/9.0, FBS û DMEM de hatine dîtin, ku aramiya hêja ya RuDA-NP destnîşan dike.Lêbelê, di navgînek asîd de (рН = 5.4) hîdrolîza Ore hate dîtin.Her weha me îstîqrara RuDA û RuDA-NP bi karanîna rêbazên kromatografiya şilkî (HPLC) bi performansa bilind nirxand.Wekî ku di xêza Pêvek 10 de tê xuyang kirin, RuDA di saeta yekem de di nav têkelek metanol û avê de (50/50, v/v) sabît bû, û piştî 4 demjimêran hîdrolîz hate dîtin.Lêbelê, tenê lûtkeyek berfereh-konveks ji bo NPyên RuDA hate dîtin.Ji ber vê yekê, kromatografiya permeation gel (GPC) ji bo nirxandina aramiya RuDA NPs di PBS de (pH = 7.4) hate bikar anîn.Wekî ku di xêza Pêvek 11 de tê xuyang kirin, piştî 8 demjimêran inkubasyonê di bin şert û mercên ceribandinê de, bilindahiya lûtkeyê, firehiya lûtkeyê û qada lûtkeyê ya NP RuDA bi girîngî neguherî, ku aramiya hêja ya NP RuDA nîşan dide.Wekî din, wêneyên TEM nîşan didin ku morfolojiya nanoparçeyên RuDA-NP piştî 24 demjimêran di tamponek PBS ya rijand (pH = 7.4, Xêra Pêvek. 12) de bi rastî neguherî dimîne.
Ji ber ku xwe-kombûn dikare taybetmendiyên cûda yên fonksiyonel û kîmyewî li Ore bide, me berdana 9,10-anthracenediylbis (methylene) dimalonic acid (ABDA, nîşana 1O2) di tevliheviyên metanol-avê de dît.Ore bi naveroka ava cuda50.Wekî ku di Xiflteya 2D û jimareya Pêvek 13 de tê xuyang kirin, dema ku naveroka avê di binê 20% de bûya ABDA nehat dîtin.Bi zêdebûna nemiyê heya %40, hilweşîna ABDA çêbû, wekî ku bi kêmbûna tundiya floransê ya ABDA diyar dibe.Di heman demê de hate dîtin ku naveroka avê ya bilindtir dibe sedema hilweşîna zûtir, û destnîşan dike ku xwe-sazkirina RuDA ji bo hilweşandina ABDA hewce û sûdmend e.Ev diyarde ji kromoforên nûjen ên ACQ (tevlihevkirin-vemirandin) pir cûda ye.Dema ku bi lazerek bi dirêjahiya pêlê 808 nm tê tîrêjkirin, hilberîna kuantûmê ya 1O2 RuDA di tevliheviyek 98% H2O/2% DMF de 16,4%, ku 82 carî ji ya ICG (ΦΔ = 0,2%) bilindtir e51, 1O2 RuDA di rewşa kombûnê de berberiyek nifşek berbiçav nîşan dide.
Elektron spinên 2,2,6,6-tetramethyl-4-piperidinone (TEMP) û 5,5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide (DMPO) wekî xefikên spin bikar tîne Ji bo naskirina cureyên encam Spektroskopiya rezonansê (ESR) hate bikar anîn. AFK.ji aliyê Rûdawê ve.Wekî ku di jimareya Pêvek 14 de tê xuyang kirin, hate pejirandin ku 1O2 di demên tîrêjê de di navbera 0 û 4 hûrdeman de çêdibe.Wekî din, dema ku RuDA bi DMPO re di bin tîrêjê de hate înkubakirin, sînyalek tîpîk EPR-a çar-xêz a 1:2:2:1 DMPO-OH· addduct hate kifş kirin, ku avakirina radîkalên hîdroksîl (OH·) destnîşan dike.Bi tevayî, encamên jorîn kapasîteya RuDA-yê destnîşan dikin ku hilberîna ROS-ê bi pêvajoyek fotosensitîzasyona dualî ya I/II ve teşwîq dike.
Ji bo baştir fêmkirina taybetmendiyên elektronîkî yên RuDA di formên monomerîk û berhevkirî de, orbîtalên molekular ên sînor ên RuDA di formên monomerîk û dimerîk de bi karanîna rêbaza DFT hatin hesibandin.Wekî ku di jimarê de tê nîşandan.3A, orbîtala molekulê ya herî dagîrkirî (HOMO) ya monomerîk RuDA li ser pişta lîgandê tê veqetandin û orbîtala molekulê ya herî nizm (LUMO) li ser yekîneya pejirandî ya TDP-yê ye.Berevajî vê, di HOMO-ya dimerîk de dendika elektronê li ser lîganda yek molekulek RuDA ye, dema ku dendika elektronê ya di LUMO de bi giranî li yekîneya pejirandî ya molekulek din a RuDA-yê ye, ku destnîşan dike ku RuDA di dimer de ye.Taybetmendiyên CT.
A HOMO û LUMO ya Ore bi formên monomerîk û dimerîk têne hesibandin.B Asta enerjiyê ya yekalî û sêqatî ya Ore di monomer û dimeran de.C Astên texmînkirî yên RuDA û kanalên ISC yên gengaz wekî C monomerîk û D dimerîk. Tîrên kanalên ISC yên gengaz destnîşan dikin.
Dabeşkirina elektron û kunên di rewşên heyecan ên yekalî yên kêm-enerjiyê yên RuDA-yê de di formên monomerîk û dimerîk de bi karanîna nermalava Multiwfn 3.852.53, ku bi rêbaza TD-DFT ve hatî hesibandin, hate analîz kirin.Wekî ku li ser labelê zêde tê destnîşan kirin.Wekî ku di Figure 1-2 de tê xuyang kirin, kunên RDA yên monomerîk bi piranî li ser pişta lîgandê di van dewletên dilşewat ên yekalî de têne veguheztin, dema ku elektron bi piranî di koma TDP de cih digirin, taybetmendiyên intramolekular ên CT-ê destnîşan dikin.Wekî din, ji bo van dewletên dilşewat ên yekalî, di navbera çal û elektronan de kêm-zêde lihevhatinek heye, ku pêşniyar dike ku van dewletên dilşewat ji heyecana herêmî (LE) hin beşdariyê dikin.Ji bo dimeran, ji bilî taybetmendiyên CT û LE yên navmolekular, rêjeyek diyarkirî ya taybetmendiyên CT-ya navmolekularî di dewletên têkildar de, nemaze S3, S4, S7, û S8, li ser bingeha analîza CT-ya navmolekularî, bi veguheztinên navmolekular ên CT-ê wekî yên sereke hatine dîtin. (Tabloya Pêvek).3).
Ji bo ku em encamên ceribandinê baştir fam bikin, me taybetmendiyên dewletên dilşewat ên RuDA lêkolîn kir da ku cûdahiyên di navbera monomer û dimeran de bigerin (Tabloyên Pêvek 4-5).Wekî ku di jimar 3B de tê xuyang kirin, astên enerjiyê yên halên heyecana yekalî û sêqat a dimerê ji yên monomerê pir zexmtir in, ku ji kêmkirina valahiya enerjiyê di navbera S1 û Tn de dibe alîkar. Hat ragihandin ku veguheztinên ISC di navbera S1 û Tn54 de di nav valahiya enerjiyê ya piçûk (ΔES1-Tn < 0.3 eV) de dikare were pêkanîn. Hat ragihandin ku veguheztinên ISC di navbera S1 û Tn54 de di nav valahiya enerjiyê ya piçûk de (ΔES1-Tn < 0.3 eV) de dikare were kirin. Ji ber vê yekê, ew dikare ISC-ê bigihîje wê yekê ku dikare di pêşnîyarên ne zêde yên enerjiyê de (DES1-Tn <0,3 эВ) di navbera S1 û Tn54 de pêk were. Hat ragihandin ku veguheztinên ISC di navbera S1 û Tn54 de di nav valahiya enerjiyê ya piçûk de (ΔES1-Tn <0,3 eV) dikare were pêkanîn.据报道，ISC 跃迁可以在S1 和Tn54 之间的小能隙（ΔES1-Tn < 0.3 eV）内实现。据报道，ISC 跃迁可以在S1 和Tn54 之间的小能隙（ΔES1-Tn < 0.3 eV）内实现。 Ji ber vê yekê, ew e ku ISC derbas dibe ku di pêş de nehêleya hêza enerjiyê (DES1-Tn < 0,3 эВ) di navbera S1 û Tn54 de pêk were. Hat ragihandin ku veguheztina ISC dikare di nav valahiya enerjiyê ya piçûk de (ΔES1-Tn < 0,3 eV) di navbera S1 û Tn54 de pêk were.Wekî din, tenê yek orbital, dagîrkirî an bêserûber, pêdivî ye ku di rewşên yekalî û sêqatîkî yên girêdayî de cûda bibe da ku entegreyek SOC-a ne-sifir peyda bike.Bi vî rengî, li ser bingeha analîzkirina enerjiya heyecanê û veguheztina orbital, hemî kanalên gengaz ên veguheztina ISC di Fig.3C,D.Nemaze, tenê kanalek ISC di monomerê de peyda dibe, dema ku forma dimerîk çar kanalên ISC hene ku dikarin veguheztina ISC zêde bikin.Ji ber vê yekê, maqûl e ku meriv texmîn bike ku molekulên RuDA çiqasî werin berhev kirin, dê kanalên ISC-ê bêtir bigihîjin.Ji ber vê yekê, berhevokên RuDA dikarin strukturên elektronîkî yên du-band di dewletên yekalî û sêqat de ava bikin, valahiya enerjiyê di navbera S1 û Tn berdest de kêm bikin, bi vî rengî karîgeriya ISC zêde bikin da ku hilberîna 1O2 hêsantir bike.
Ji bo ronîkirina mekanîzmaya bingehîn, me pêkhateyek referansê ya kompleksa arene-Ru(II) (RuET) sentez kir û du komên etilê bi du komên phenyl trifenylamine li RuDA veguhezand (Hêjîrê. 4A, ji bo taybetmendiya tevahî, binêre ESI, Pêvek 15 -21 ) Ji donor (diethylamine) bigire heya qebûlker (TDF), RuET xwedî heman taybetmendiyên CT-ya intramolekularî ya RuDA ye.Wekî ku tê çaverê kirin, spektruma vegirtinê ya RuET di DMF de bandek veguheztina bargiraniya enerjiyê ya kêm bi vegirtinek bihêz li devera înfrasor a nêzê li herêma 600-1100 nm nîşan da (Wêne. 4B).Digel vê yekê, kombûna RuET jî bi zêdebûna naveroka avê re hate dîtin, ku ev yek di veguheztina sor a herî zêde vegirtinê de hate xuyang kirin, ku ev yek ji hêla wênekirina AFM-ya şil ve hate piştrast kirin (Hêjmara Pêvek. 22).Encam destnîşan dikin ku RuET, mîna RuDA, dikare dewletên intramolekular ava bike û xwe di nav strukturên hevgirtî de bicivîne.
Struktura kîmyewî ya RuET.B Spektrên vegirtinê yên RuET di tevliheviyên rêjeyên cihêreng ên DMF û avê de.Plots C EIS Nyquist ji bo RuDA û RuET.Bersivên wênekêşana D ya RuDA û RuET di bin çalakiya tîrêjên lazerê de bi dirêjahiya pêlê 808 nm.
Wêneya ABDA di hebûna RuET de bi tîrêjê bi lazerek bi dirêjahiya pêlê 808 nm hate nirxandin.Ecêb e, ku ABDA di perçeyên cûrbecûr ên avê de tunebûnek nehatiye dîtin (Hêjmara Pêvek. 23).Sedemek mimkun ev e ku RuET nekare avahiyek elektronîkî ya bibandor bi bandor ava bike ji ber ku zincîra etilê veguheztina barkêşiya navmolekularî ya bikêr pêş nakeve.Ji ber vê yekê, spektroskopiya impedansê ya elektrokîmyayî (EIS) û pîvandinên wêneya derbasbûyî hatin kirin da ku taybetmendiyên fotoelektrokîmyayî yên RuDA û RuET bidin ber hev.Li gorî nexşeya Nyquist (Wêne 4C), RuDA ji RuET tîrêjek pir piçûktir nîşan dide, ku tê vê wateyê ku RuDA56 xwedan veguheztina elektronê ya navmolekularî zûtir û guheztinek çêtir e.Digel vê yekê, tîrêjiya wênekêşana RuDA ji ya RuET (Hêjî. 4D) pirtir e, û bi vê yekê re karîgerîya veguhastina barkirinê ya çêtir a RuDA57 piştrast dike.Bi vî rengî, koma phenyl ya trifenylamine li Ore di peydakirina veguheztina bara navmolekulî û avakirina avahiyek elektronîkî ya band de rolek girîng dilîze.
Ji bo zêdekirina kombûna tumorê û biyolojiya di vivo de, me RuDA bi F127-ê bêtir vegirtin.Pîvana hîdrodînamîkî ya navînî ya RuDA-NPs hate destnîşankirin ku 123.1 nm bi dabeşek teng (PDI = 0.089) bi karanîna rêbaza belavbûna ronahiya dînamîkî (DLS) (Wêne 5A), ku bi zêdekirina permeability û ragirtinê ve berhevkirina tumor pêşve dike.EPR) bandora.Wêneyên TEM-ê nîşan didin ku NP-yên Ore xwedan şeklek gewherî ya yekreng e ku bi dirêjahiya navînî 86 nm e.Nemaze, herî zêde vegirtinê ya RuDA-NP di 800 nm de xuya bû (Hêjmara Pêvek. 24), ku nîşan dide ku RuDA-NP dibe ku fonksiyon û taybetmendiyên RuDA-yên xwe-sazkirî bihêle.Berhema kuantûmê ya ROS-ê ya hesabkirî ya ji bo NP Ore %15,9 e ku bi Ore re tê berhev kirin.Taybetmendiyên fototermal ên RuDA NPs di bin çalakiya tîrêjên lazerê yên bi dirêjahiya pêlên 808 nm de bi kamerayek infrared ve hatine lêkolîn kirin.Wekî ku di jimarê de tê nîşandan.5B,C, koma kontrolê (tenê PBS) di germahiyê de zêdebûnek piçûk dît, dema ku germahiya çareseriya RuDA-NPs bi zêdebûna germahiyê (ΔT) bi 15.5, 26.1, û 43.0 °C bi lez zêde bû.Girêdanên bilind bi rêzdarî 25, 50, û 100 μM bûn, ku bandorek fototermal a bihêz a RuDA NPs destnîşan dike.Wekî din, pîvandinên çerxa germkirinê / sarkirinê hatin girtin da ku aramiya fototermal a RuDA-NP binirxînin û bi ICG re bidin hev.Germahiya Ore NPs piştî pênc çerxên germkirin/sarkirinê kêm nebû (Hêjîrê. 5D), ku ev yek aramiya fototermal a hêja ya NP-ên Ore nîşan dide.Berevajî vê, ICG îstîqrara fotothermalê ya kêmtir nîşan dide ku ji windabûna eşkere ya deşta germahiya fototermal di bin heman şertan de tê dîtin.Li gorî rêbaza berê58, karbidestiya veguherîna fototermî (PCE) ya RuDA-NP wekî 24,2% hate hesibandin, ku ji materyalên fototermîk ên heyî yên wekî nanorodên zêr (21,0%) û nanoqelên zêr (13,0%)59 bilindtir e.Ji ber vê yekê, NP Ore taybetmendiyên fototermîk ên hêja nîşan dide, ku wan ji nûnerên PTT-ê sozdar dike.
Analîzkirina wêneyên DLS û TEM yên RuDA NPs (navdêr).B Wêneyên germî yên hûrgelên cihêreng ên RuDA NP-ên ku di dirêjahiya pêlê 808 nm (0,5 W cm-2) de li ber tîrêjên lazerê têne xuyang kirin.C Kûçikên veguherîna fototermîk ên cûrbecûr hûrgelên madenê yên NP, ku daneyên mîqdar in.B. D Zêdebûna germahiya ORE NP û ICG li ser 5 çerxên germkirin-sarkirin.
Photocytotoxicity ya RuDA NPs li dijî hucreyên kansera pêsîrê MDA-MB-231 in vitro hate nirxandin.Wekî ku di jimarê de tê nîşandan.6A, B, RuDA-NP û RuDA di nebûna tîrêjê de cytotoxicityek neguhêz nîşan dan, ku tê wateya jahrbûna tarî ya kêmtir a RuDA-NP û RuDA.Lêbelê, piştî radyasyona lazerê ya bi dirêjahiya pêlê 808 nm, RuDA û RuDA NPs li dijî hucreyên kanserê MDA-MB-231 bi nirxa IC50 (nîv-herî zêde giraniya astengkirinê) bi rêzdarî 5,4 û 9,4 μM, photocytotoxicity xurt nîşan dan. ku RuDA-NP û RuDA potansiyela fototerapiya penceşêrê heye.Wekî din, photocytotoxicity ya RuDA-NP û RuDA di hebûna vîtamîna C (Vc), paqijkerek ROS-ê de, ji bo ronîkirina rola ROS-ê di cytotoxiciya ronahiyê de bêtir hate lêkolîn kirin.Zelal, zindîbûna hucreyê piştî lêzêdekirina Vc zêde bû, û nirxên IC50 yên RuDA û RuDA NP bi rêzê 25.7 û 40.0 μM bûn, ku rola girîng a ROS-ê di fotocytotoxicity ya RuDA û RuDA NP de îsbat dike.Sîtotoksîkiya ronahiyê ya RuDA-NP û RuDA di şaneyên kanserê MDA-MB-231 de bi rengkirina şaneya zindî/mirî bi karanîna calcein AM (fluoresansa kesk ji bo şaneyên zindî) û propidium iodide (PI, floransê sor ji bo şaneyên mirî).ji hêla şaneyan ve têne pejirandin) wekî sondajên fluorescent.Wekî ku di Figure 6C de tê xuyang kirin, hucreyên ku bi RuDA-NP an RuDA hatine derman kirin bêyî tîrêjê zindî dimînin, wekî ku ji hêla fluoresansa kesk a hişk ve hatî xuyang kirin.Berevajî vê, di bin tîrêjkirina lazerê de, tenê fluorescence sor hate dîtin, ku fotocytotoxicitiya bandorker a RuDA an RuDA NPs piştrast dike.Hêjayî balkişandinê ye ku bi zêdekirina Vc re fluorescence kesk xuya bû, ku ev yek binpêkirina fotocytotoxicity ya RuDA û RuDA NPs nîşan dide.Ev encam bi vekolînên photocytotoxicity in vitro re hevaheng in.
Zindîbûna bi dozê ya hucreyên A RuDA- û B RuDA-NP di şaneyên MDA-MB-231 de bi rêzê ve di hebûn an tunebûna Vc (0.5 mM) de.Barên çewtiyê, navîn ± veqetandina standard (n = 3). Tîmtîhanên nehevkirî, du alî *p <0,05, **p <0,01, û ***p <0,001. Tîmtîhanên nehevkirî, du alî *p <0,05, **p <0,01, û ***p <0,001. Непарные двусторонние t-критерии *p <0,05, **p <0,01 и ***p <0,001. T-testên du-pişk ên nehevkirî *p<0.05, **p<0.01, û ***p<0.001.未配对的双边t 检验*p < 0,05、**p < 0,01 和***p < 0,001。未配对的双边t 检验*p < 0,05、**p < 0,01 和***p < 0,001。 Neparnыe двусторонние t-testы *p <0,05, **p <0,01 и ***p <0,001. T-testên du-pişk ên nehevkirî *p<0.05, **p<0.01, û ***p<0.001.C Analîzkirina rengdêra şaneya zindî/mirî bi karanîna calcein AM û propidium iodide wekî sondayên fluorescent bikar tîne.Bara pîvanê: 30 μm.Wêneyên nûnerê sê dubareyên biyolojîkî ji her komê têne destnîşan kirin.D Wêneyên fluorescence Confocal ên hilberîna ROS-ê di hucreyên MDA-MB-231 de di bin şert û mercên cûda yên dermankirinê de.Floresensa kesk a DCF hebûna ROS nîşan dide.Bi lazereke bi dirêjahiya pêlê 808 nm û bi hêza 0,5 W/cm2 10 deqîqeyan (300 J/cm2) tîrêj bikin.Bara pîvanê: 30 μm.Wêneyên nûnerê sê dubareyên biyolojîkî ji her komê têne destnîşan kirin.E Flow cytometry RuDA-NPs (50 µM) an jî RuDA (50 µM) Analîzkirina dermankirinê bi lazera 808 nm (0,5 W cm-2) an bêyî wê di hebûn û nebûna Vc (0,5 mM) de ji bo 10 hûrdeman.Wêneyên nûnerê sê dubareyên biyolojîkî ji her komê têne destnîşan kirin.F Nrf-2, HSP70 û HO-1 hucreyên MDA-MB-231 ên ku bi RuDA-NPs (50 µM) bi tîrêjkirina lazerê ya 808 nm an bêyî (0,5 W cm-2, 10 min, 300 J cm-2) hatine derman kirin, şaneyên 2 diyar dikin).Wêneyên nûnerê du dubareyên biyolojîkî ji her komê têne destnîşan kirin.
Hilberîna ROS-a hundurîn a di hucreyên MDA-MB-231 de bi karanîna rêbaza rengkirina 2,7-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFH-DA) ve hatî lêkolîn kirin.Wekî ku di jimarê de tê nîşandan.6D, hucreyên ku bi RuDA-NPs an jî RuDA têne derman kirin dema ku bi lazera 808 nm têne tîrêjkirin fluoresansek kesk ya cihêreng nîşan didin, ev destnîşan dike ku RuDA-NP û RuDA xwedan şiyanek bikêrhatî ne ku ROS çêbikin.Berevajî vê, di nebûna ronahiyê de an jî di hebûna Vc de, tenê îşaretek fluorescent a qels a hucreyan hate dîtin, ku pêkhateyek piçûk a ROS nîşan dide.Asta ROS ya hundurîn a di hucreyên RuDA-NP û hucreyên MDA-MB-231 ên bi RuDA-dermankirî de ji hêla sîtometrîya herikînê ve bêtir hate destnîşankirin.Wekî ku di jimareya Pêvek 25 de tê xuyang kirin, navînî ziraviya floransê (MFI) ya ku ji hêla RuDA-NP û RuDA ve di bin tîrêjên lazerê yên 808 nm de hatî çêkirin, bi rêzê ve bi qasî 5.1 û 4.8 carî zêde bû, li gorî koma kontrolê, û avakirina wan a hêja AFK piştrast kir.kanîn.Lêbelê, astên ROS-ê yên hundurîn ên di hucreyên RuDA-NP an MDA-MB-231 ên ku bi RuDA re têne derman kirin tenê bi kontrolên bêyî tîrêjkirina lazerê an bi hebûna Vc re, mîna encamên analîza floransê ya konfokal re hevber bûn.
Hat diyar kirin ku mitokondrî hedefa sereke ya kompleksên Ru(II)-arene ne60.Ji ber vê yekê, herêmîkirina subcellular a RuDA û RuDA-NPs hate lêkolîn kirin.Wekî ku di jimareya Pêvek 26 de tê xuyang kirin, RuDA û RuDA-NP profîlên dabeşkirina hucreyî yên mîna hev ên ku di mîtokondriyayê de kombûna herî zêde nîşan didin (bi rêzdarî 62,5 ± 4,3 û 60,4 ± 3,6 ng/mg proteîn).Lêbelê, tenê hindikek Ru di perçeyên navokî yên Ore û NP Ore de hate dîtin (bi rêzê, 3,5 û 2,1%).Parçeya hucreya mayî ruteniumê mayî heye: 31,7% (30,6 ± 3,4 ng/mg proteîn) ji bo RuDA û 42,9% (47,2 ± 4,5 ng/mg proteîn) ji bo RuDA-NPs.Bi gelemperî, Ore û NP Ore bi gelemperî di mitochondria de têne kom kirin.Ji bo nirxandina bêserûberiya mîtokondrîal, me bi rêzê ve rengdêra JC-1 û MitoSOX Red bikar anî da ku bi rêzdarî potansiyela membrana mîtokondrial û kapasîteya hilberîna superoksîdê binirxîne.Wekî ku di Figure 27-ê de tê xuyang kirin, di şaneyên ku bi RuDA û RuDA-NPs re di bin tîrêjên lazerê yên 808 nm de hatine derman kirin, fluoresansa kesk a tund (JC-1) û sor (MitoSOX Red) hate dîtin, ku nîşan dide ku hem RuDA û hem jî RuDA-NP pir fluorescent in. Ew dikare bi bandor depolarîzasyona membrana mitochondrial û hilberîna superoxide bike.Wekî din, mekanîzmaya mirina hucreyê bi karanîna analîza li ser bingeha sîtometrîya herikînê ya annexin V-FITC / propidium iodide (PI) hate destnîşankirin.Wekî ku di Figure 6E de tê xuyang kirin, dema ku bi lazera 808 nm hate tîrêjkirin, RuDA û RuDA-NP di hucreyên MDA-MB-231 de li gorî PBS an PBS plus rêjeyek apoptoza zû (çargoşeya rastê ya jêrîn) bi girîngî zêde kir.şaneyên pêvajoyî.Lêbelê, dema ku Vc hate zêdekirin, rêjeya apoptoza RuDA û RuDA-NP bi rêzdarî ji %50.9 û 52.0% daket 15.8% û 17.8%, ku rola girîng a ROS-ê di fotosîtoksîbûna RuDA û RuDA-NP de piştrast dike..Wekî din, hucreyên nekrotîkî yên sivik di hemî komên ceribandinê de (çargoşeya çepê ya jorîn) hatin dîtin, ku pêşniyar dike ku apoptosis dibe ku forma serdest a mirina hucreyê ya ku ji hêla RuDA û RuDA-NP ve hatî çêkirin be.
Ji ber ku zirara stresa oksîtasyonê diyarkerek sereke ya apoptozê ye, faktora nukleerî ya ku bi erythroid 2, faktora 2 (Nrf2) 62, rêgezek sereke ya pergala antîoksîdan ve têkildar e, di MDA-MB-231-ê ya ku bi RuDA-NPs ve hatî derman kirin ve hatî lêkolîn kirin.Mekanîzmaya çalakiya RuDA NPs ji hêla tîrêjê ve hatî çêkirin.Di heman demê de, îfadeya proteîna jêrîn heme oxygenase 1 (HO-1) jî hate tespît kirin.Wekî ku di Figure 6F û Figure 29-ê de tê xuyang kirin, fototerapiya bi navbeynkariya RuDA-NP li gorî koma PBS astên îfadeya Nrf2 û HO-1 zêde kir, û destnîşan dike ku RuDA-NP dibe ku rêyên nîşana stresa oksîdative teşwîq bike.Wekî din, ji bo lêkolîna bandora fototermal a RuDA-NPs63, vegotina proteîna şokê ya germê Hsp70 jî hate nirxandin.Eşkere ye ku hucreyên ku bi RuDA-NPs + tîrêjkirina lazerê ya 808 nm têne derman kirin, li gorî du komên din zêde îfadeya Hsp70 nîşan didin, ku bersivek hucreyî ya ji hîpertermiyê re nîşan dide.
Encamên berbiçav ên in vitro me teşwîq kir ku em li ser performansa in vivo ya RuDA-NP di mişkên tazî yên bi tumorên MDA-MB-231 de lêkolîn bikin.Dabeşkirina tevnvîsê ya RuDA NPs bi destnîşankirina naveroka ruthenium di kezeb, dil, spî, gurçik, pişik û tumor de hate lêkolîn kirin.Wekî ku di jimarê de tê nîşandan.7A, naveroka herî zêde ya Ore NPs di organên normal de di dema çavdêriya yekem (4 demjimêran) de xuya bû, dema ku naveroka herî zêde di nav tevnên tumorê de 8 demjimêran piştî derzîlêdanê hate destnîşankirin, dibe ku ji ber Ore NPs.Bandora EPR ya LF.Li gorî encamên belavkirinê, maweya herî baş a dermankirina bi NP ore 8 demjimêran piştî rêveberiyê hate girtin.Ji bo ronîkirina pêvajoya berhevkirina RuDA-NPs li deverên tumor, taybetmendiyên fotoakûstîk (PA) yên RuDA-NP-ê bi tomarkirina nîşanên PA-yê yên RuDA-NP-ê di demên cûda de piştî derzîlêdanê hatin şopandin.Pêşîn, sînyala PA ya RuDA-NP di vivo de bi tomarkirina wêneyên PA yên cîhek tumor piştî derzîlêdana intratumoral a RuDA-NP hate nirxandin.Wekî ku di jimareya Pêvek 30 de tê xuyang kirin, RuDA-NP îşaretek PA-ya bihêz nîşan da, û têkiliyek erênî di navbera giraniya RuDA-NP û tundiya nîşana PA de hebû (Wêneya Pêvek 30A).Dûv re, wêneyên in vivo PA yên deverên tumor piştî derzîlêdana hundurîn a RuDA û RuDA-NP di demên cûda yên piştî derzîlêdanê de hatin tomar kirin.Wekî ku di Figure 7B de tê xuyang kirin, sînyala PA ya RuDA-NPs ji cîhê tumor hêdî hêdî bi demê re zêde bû û di 8 demjimêran de piştî derzîlêdanê gihîşt astekê, li gorî encamên belavkirina tevnê ku ji hêla analîza ICP-MS ve hatî destnîşankirin.Bi rêzgirtina RuDA (Hêjîra Pêvek. 30B), tundiya sînyala PA ya herî zêde 4 demjimêran piştî derzîlêdanê xuya bû, ku rêjeya bilez a ketina RuDA di tumorê de destnîşan dike.Wekî din, tevgera derxistina RuDA û RuDA-NP bi destnîşankirina mîqdara ruthenium di mîz û feqiyan de bi karanîna ICP-MS ve hate lêkolîn kirin.Riya sereke ya rakirina RuDA (Hêjmara Pêvek. 31) û RuDA-NPs (Hêj. 7C) bi feciyan e, û paqijkirina bi bandor a RuDA û RuDA-NP-an di heyama lêkolînê ya 8-rojî de hate dîtin, ku tê vê wateyê ku RuDA û RuDA-NPs dibe ku bi bandor ji laş bêyî jehrînek demdirêj were derxistin.
A. Dabeşkirina ex vivo ya RuDA-NP di nav tevnên mişkî de ji hêla naveroka Ru (ji sedî dozê ya Ru (ID) ve hatî rêve kirin ji her gramek tevnvîsê) di demên cûda de piştî derzîlêdanê hate destnîşankirin.Daneyên navînî ± veqetandina standard in (n = 3). Tîmtîhanên nehevkirî, du alî *p <0,05, **p <0,01, û ***p <0,001. Tîmtîhanên nehevkirî, du alî *p <0,05, **p <0,01, û ***p <0,001. Непарные двусторонние t-критерии *p <0,05, **p <0,01 и ***p <0,001. T-testên du-pişk ên nehevkirî *p<0.05, **p<0.01, û ***p<0.001.未配对的双边t 检验*p < 0,05、**p < 0,01 和***p < 0,001。未配对的双边t 检验*p < 0,05、**p < 0,01 和***p < 0,001。 Neparnыe двусторонние t-testы *p <0,05, **p <0,01 и ***p <0,001. T-testên du-pişk ên nehevkirî *p<0.05, **p<0.01, û ***p<0.001.Wêneyên B PA yên cîhên tîmorê yên in vivo li 808 nm heyecanê piştî rêveberiya hundurîn a RuDA-NPs (10 μmol kg-1) di demên cûda de.Piştî danasîna hundurîn a RuDA NPs (10 μmol kg-1), C Ru ji mişkan bi mîz û feqîyan re di navberên demên cûda de hate derxistin.Daneyên navînî ± veqetandina standard in (n = 3).
Kapasîteya germkirinê ya RuDA-NP di vivo de li mêşên tazî yên bi tumorên MDA-MB-231 û RuDA ji bo berhevdanê hate lêkolîn kirin.Wekî ku di jimarê de tê nîşandan.8A û Fig.Lêbelê, germahiya RuDA-NP û RuDA bi germahiya herî zêde 55,2 û 49,9 °C, bi rêzê ve bi lez zêde bû, ji bo tedawiya penceşêrê di vivo de hîpertermiya têr peyda dike.Zêdebûna li germahiya bilind a ji bo RuDA NPs (ΔT ≈ 24°C) li gorî RuDA (ΔT ≈ 19°C) dibe ku ji ber bandora wê ya EPR-ê di nav tevnên tîmorê de çêtir derbasbûn û berhevkirina wê be.
Wêneyên germî yên infrared ên mişkên bi tumorên MDA-MB-231 bi lazera 808 nm di demên cûda de 8 demjimêran piştî derzîlêdanê hatine tîrêj kirin.Wêneyên nûner ên çar dubareyên biyolojîkî ji her komê têne destnîşan kirin.B Hêjmara tumorê ya têkildar û C Di dema dermankirinê de girseya tumor a navîn a komên cûda yên mişkan.D Kevirên giraniya laşê komên cihê yên mişkan.Bi lazereke bi dirêjahiya pêlê 808 nm û bi hêza 0,5 W/cm2 10 deqîqeyan (300 J/cm2) tîrêj bikin.Barên çewtiyê, navîn ± veqetandina standard (n = 3). Tîmtîhanên nehevkirî, du alî *p <0,05, **p <0,01, û ***p <0,001. Tîmtîhanên nehevkirî, du alî *p <0,05, **p <0,01, û ***p <0,001. Непарные двусторонние t-критерии *p <0,05, **p <0,01 и ***p <0,001. T-testên du-pişk ên nehevkirî *p<0.05, **p<0.01, û ***p<0.001.未配对的双边t 检验*p < 0,05、**p < 0,01 和***p < 0,001。未配对的双边t 检验*p < 0,05、**p < 0,01 和***p < 0,001。 Neparnыe двусторонние t-testы *p <0,05, **p <0,01 и ***p <0,001. T-testên du-pişk ên nehevkirî *p<0.05, **p<0.01, û ***p<0.001. E H&E wêneyên organên sereke û tumorên ji komên dermankirinê yên cihêreng, di nav de Saline, Saline + Laser, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs, û RuDA-NPs + komên Laser. E H&E wêneyên organên sereke û tumorên ji komên dermankirinê yên cihêreng, di nav de Saline, Saline + Laser, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs, û RuDA-NPs + komên Laser. Hilberîna okraşîvaniya E H&E ji nûve organov û nepenî ji grûpên lîberê, di nav koma fîzyolojîkî ya hilweşandinê de, fîzyolojiya hilweşandinê + lazera, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs û RuDAN-ê. E H&E wêneyên organên sereke û tîmorên ji komên dermankirinê yên cihêreng, di nav de saline, saline + lazer, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs, û RuDA-NPs + komên Laser.来自 不同不同 组 的 主要 器官 和 肿瘤 的 e H & E 染色 图像, 包括包括, 盐 水 + 激光, ruda, ruda + 激光, ruda-nps 和 ruda-nps +.来自不同治疗组的主要器官和肿瘤的E H&E Okrashivaye E H&E ji nûve organov û opuholey ji grûpa lekeniya, veqetandina fîzyolojîkî, fîzyolojiya rûkal + lazer, RuDA, RuDA + lazer, RuDA-NPs û RuDA-NPs + lazer. E rengkirina H&E ya organên sereke û tumorên ji komên dermankirinê yên cihêreng di nav de saline, saline + lazer, RuDA, RuDA + lazer, RuDA-NPs, û RuDA-NPs + lazer.Bara pîvanê: 60 μm.
Bandora fototerapiya in vivo bi RuDA û RuDA NPs re hate nirxandin ku tê de mêşên tazî yên bi tumorên MDA-MB-231 bi navgîniya RuDA an RuDA NPs bi yek dozek 10.0 μmol kg-1 bi rêka dûvikê ve hatine derzî kirin, û dûv re 8 saetan piştî derzîlêdanê.tîrêjkirina lazerê bi dirêjahiya pêlê 808 nm.Wekî ku di Figure 8B de tê xuyang kirin, hêjmarên tumor di komên saline û lazerê de bi girîngî zêde bûne, ev destnîşan dike ku tîrêjkirina saline an lazer 808 bandorek hindik li ser mezinbûna tumor heye.Mîna ku di koma şor de, mezinbûna bilez a tumorê jî di mêşên ku bi RuDA-NPs an jî RuDA re hatine dermankirin di nebûna tîrêjkirina lazerê de hate dîtin, ku jehra wan a tarî ya kêm nîşan dide.Berevajî vê, piştî tîrêjkirina lazerê, hem dermankirina RuDA-NP û hem jî RuDA paşveçûnek girîng a tîmorê bi kêmkirina qebareya tumorê bi rêzê 95.2% û 84.3%, li gorî koma dermankirî ya xwê, nîşan dide ku PDT-ya hevrêzî ya hêja nîşan dide., bi navbeynkariya bandora RuDA/CHTV.- NP an Ore Li gorî RuDA, RuDA NP bandorek fototerapî çêtir nîşan da, ku bi piranî ji ber bandora EPR ya RuDA NP bû.Encamên astengkirina mezinbûna tumorê ji hêla giraniya tîmorê ve di roja 15-ê dermankirinê de hate derxistin (Wêne. 8C û Hêjîrê. 33).Navgîniya girseya tumorê di mêşên ku bi RuDA-NP û mêşên dermankirî yên RuDA bi rêzê ve 0,08 û 0,27 g bû, ku ji koma kontrolê (1,43 g) pir siviktir bû.
Wekî din, giraniya laşê mişkan her sê rojan carekê hate tomar kirin da ku jehra tarî ya RuDA-NP an RuDA di vivo de were lêkolîn kirin.Wekî ku di Figure 8D de tê xuyang kirin, ji bo hemî komên dermankirinê cûdahiyên girîng di giraniya laş de nehatin dîtin. Wekî din, rengkirina hematoxylin û eosin (H&E) ya organên sereke (dil, kezeb, spehît, pişik û gurçik) ji komên dermankirinê yên cihêreng hatin kirin. Wekî din, rengkirina hematoxylin û eosin (H&E) ya organên sereke (dil, kezeb, pişik, pişik û gurçik) ji komên dermankirinê yên cihêreng hatin kirin. Krome togo, bыlo provedno окрашивание gematoksilinom û eozinom (H&E) organên nû (serdca, peçeni, selezenki, legkih and pock) ji grupp lecheniya. Wekî din, bi hematoxylin û eosin (H&E) rengdêra organên sereke (dil, kezeb, spêf, pişik û gurçik) ji komên dermankirinê yên cihêreng hate kirin.此外，对不同治疗组的主要器官（心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏）进脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏）进行辋辏 (EW) Krome того, проводили окрашивание гематоксилином и эozinom (H&E) organên nû (serdca, peçeni, selezenki, legkih and poch) di nav gruppah lecheniya de. Wekî din, di komên dermankirinê yên cihêreng de rengkirina hematoxylin û eosin (H&E) ya organên sereke (dil, kezeb, spêf, pişik û gurçik) hate kirin.Wekî ku di Fig.8E, wêneyên rengdêra H&E yên pênc organên sereke yên ji komên RuDA-NPs û RuDA ne anormalî an zirarên organan eşkere ne. 8E, wêneyên rengdêra H&E yên pênc organên sereke yên ji komên RuDA-NPs û RuDA ne anormalî an zirarên organan eşkere ne.Wekî ku di jimarê de tê nîşandan.8E, изображения окрашивания H&E ji grûpên RuDA-NPs û RuDA ne demonstriruyut явных аномалий или повреждений organov. Wêneyên 8E, H&E yên rengdêr ên pênc organên sereke yên ji komên RuDA-NP û RuDA, tu anormalî an birînên organan ên eşkere nîşan nadin.如图8E 所示，来自RuDA-NPs 和RuDA 组的五个主要器官的H&E 染色图像没有显示圳如图8E 所示，来自RuDA-NPs 和RuDA 组的五个主要器官的H&E Как показано на рисунке 8E, изображения окрашивания H&E няти основных органов из групп RuDA-NPs û RuDA ne diyar явных аномалий или повреждения органов. Wekî ku di Figure 8E de tê xuyang kirin, wêneyên rengdêra H&E yên pênc organên sereke yên ji komên RuDA-NP û RuDA ne anormaliyên eşkere an zirara organan nîşan nedan.Van encaman destnîşan kir ku ne RuDA-NP û ne jî RuDA di vivo de nîşanên jehrê nîşan nedan. Wekî din, wêneyên rengdêra H&E yên tumoran destnîşan kirin ku her du komên RuDA + Laser û RuDA-NPs + Laser dikarin bibin sedema hilweşîna hucreya penceşêrê ya giran, ku bandoriya fototerapî ya hêja ya di vivo de ya RuDA û RuDA-NPs destnîşan dike. Wekî din, wêneyên rengdêra H&E yên tumoran destnîşan kirin ku her du komên RuDA + Laser û RuDA-NPs + Laser dikarin bibin sedema hilweşîna hucreya penceşêrê ya giran, ku bandoriya fototerapî ya hêja ya di vivo de ya RuDA û RuDA-NPs destnîşan dike.Wekî din, wêneyên tumorê yên bi hematoxylin-eosin destnîşan kirin ku her du komên RuDA+Laser û RuDA-NPs+Laser dikarin hilweşîna giran a hucreyên penceşêrê derxînin, ku bandoriya fototerapî ya bilind a RuDA û RuDA-NPs di vivo de destnîşan dikin., 肿瘤肿瘤 h & e 染色 图像 显示, ruda + lazer 和 ruda-nps + lazer 组均 可 导致 导致 的 癌细胞 可, 证明 ruda 和 优异 的 体内 光疗 的., 肿瘤 的 & e 染色 显示, ruda + lazer 和 ruda-nps + lazer 组均 导致 的 癌 细胞 破坏, 证明 了 ruda 和 ruda-nps 的 的 体内 光疗 ............. ..Wekî din, wêneyên tumorê yên bi hematoksîlîn û eosin destnîşan kirin ku her du komên RuDA+Laser û RuDA-NPs+Laser bûne sedema hilweşîna giran a hucreyên penceşêrê, ku bandoriya fototerapî ya hêja ya RuDA û RuDA-NPs di vivo de nîşan dide.
Di encamê de, kompleksa organometalîkî ya Ru (II) -arene (RuDA) bi lîgandên DA-type re hate sêwirandin da ku pêvajoya ISC-ê bi karanîna rêbaza berhevkirinê hêsan bike.RuDA-ya sentezkirî dikare bi navgîniya danûstendinên ne-kovalentî ve xwe bicivîne da ku pergalên supramolekular ên ji RuDA-yê hatî çêkirin ava bike, bi vî rengî avakirina 1O2 û veguheztina fotothermal a bikêr ji bo dermankirina penceşêrê ya ronahiyê hêsan dike.Hêjayî balkişandinê ye ku RuDA monomerîk 1O2 di bin tîrêjkirina lazerê de di 808 nm de çênekir, lê dikaribû di rewşa berhevkirî de mîqdarek mezin a 1O2 biafirîne, ku rasyonelbûn û karbidestiya sêwirana me destnîşan dike.Lêkolînên paşîn destnîşan kirin ku kombûna supramolekular RuDA bi taybetmendiyên fotofizîkî û fotokîmyayî yên çêtir, yên wekî veguheztina sor û berxwedana wênekêşandinê, ku ji bo pêvajoya PDT û PTT pir tê xwestin, dide RuDA.Hem di ceribandinên in vitro û hem jî di vivo de destnîşan kirin ku RuDA NP-yên bi biyolojîkî û berhevbûna baş a di tumorê de li ser tîrêjkirina lazerê di dirêjahiya pêla 808 nm de çalakiyek antîpenceşêrê ya ronahiyê ya hêja nîşan didin.Bi vî rengî, RuDA NPs wekî reagentên bimodal ên supramolekular PDT/PTW yên bibandor dê koma wênesazkerên ku di dirêjahiya pêlên li jor 800 nm de têne çalak kirin dewlemend bikin.Sêwirana têgehî ya pergala supramolekular rêyek bikêrhatî ji bo fotosensitîzatorên NIR-aktîfkirî bi bandorên hestyarî yên hêja peyda dike.
Hemî kîmyewî û çareserker ji dabînkerên bazirganî hatine wergirtin û bêyî paqijkirina bêtir têne bikar anîn.RuCl3 ji Boren Precious Metals Co., Ltd. (Kunming, Çîn) hate kirîn.[(η6-p-cym)Ru(fendio)Cl]Cl (fendio = 1,10-fenantroline-5,6-dion) û 4,7-bis[4-(N,N-dîfenîlamîno)fenîl]-5 ,6-Diamino-2,1,3-benzothiadiazole li gorî lêkolînên berê64,65 hate sentez kirin.Spektrên NMR li ser spektrometerek Bruker Avance III-HD 600 MHz li Navenda Testa Analîtîk a Zanîngeha Başûr-rojhilat bi karanîna d6-DMSO an CDCl3 wekî çareserker hate tomar kirin.Guhertinên kîmyewî δ di ppm de têne dayîn.bi rêzgirtina tetramethylsilane, û domdarên danûstendinê J di hertz de bi nirxên bêkêmasî têne dayîn.Spektrometrîya girseyî ya rezîliya bilind (HRMS) li ser amûrek Agilent 6224 ESI / TOF MS hate kirin.Analîza hêmanan a C, H, û N li ser analîzkerek elemental Vario MICROCHNOS (Elementar) hate kirin.Spectrophotometerek Shimadzu UV3600 li ser spektrofotometerek UV-dîtbar hatin pîvandin.Li ser spektrofluorimeterek Shimadzu RF-6000 Spektrên floransê hatin tomarkirin.Spektrên EPR li ser amûrek Bruker EMXmicro-6/1 hatin tomar kirin.Morfolojî û avahiya nimûneyên hatine amadekirin li ser amûrên FEI Tecnai G20 (TEM) û Bruker Icon (AFM) hatine lêkolîn kirin ku di voltaja 200 kV de dixebitin.Belavkirina ronahiyê ya dînamîk (DLS) li ser analîzkerek Nanobrook Omni (Brookhaven) hate kirin.Taybetmendiyên fotoelektrokîmyayî li ser sazûmanek elektrokîmyayî (CHI-660, Chinaîn) hatin pîvandin.Wêneyên fotoakûstîk bi karanîna pergala FUJIFILM VisualSonics Vevo® LAZR hatin wergirtin.Wêneyên konfokal bi karanîna mîkroskopa konfokal a Olympus FV3000 hatin wergirtin.Analîza FACS li ser sîtometra herikîna BD Calibur hate kirin.Ceribandinên kromatografiya şilkî ya bi performansa bilind (HPLC) li ser pergalek Waters Alliance e2695 bi karanîna detektorek UV/Vis 2489 hatin kirin.Testên Kromatografiya Permeation Gel (GPC) li ser amûrek Thermo ULTIMATE 3000 bi karanîna detektorek nîşana refraksiyonê ya ERC RefratoMax520 hate tomar kirin.
[(η6-p-cym)Ru(fendio)Cl]Cl (fendio = 1,10-fenantroline-5,6-dion)64 (481,0 mg, 1,0 mmol), 4,7-bis[4 -(N, N-dîfenîlamîno)fenîl]-5,6-dîamino-2,1,3-benzothiadiazole 65 (652,0 mg, 1,0 mmol) û asîda acetîk a glacial (30 mL) 12 saetan li sarinca refluksê hatin şilkirin.Dûv re solvan di valahiyê de bi karanîna vaporatorek zivirî hate rakirin.Bermayiya ku derketî bi kromatografiya stûna flashê (silica gel, CH2Cl2:MeOH=20:1) hate paqij kirin ku RuDA wekî tozek kesk were bidestxistin (berber: 877,5 mg, 80%).qûn.Ji bo C64H48Cl2N8RuS tê hesabkirin: C 67.84, H 4.27, N 9.89.Hat dîtin: C 67,92, H 4,26, N 9,82.1H NMR (600 MHz, d6-DMSO) δ 10.04 (s, 2H), 8.98 (s, 2H), 8.15 (s, 2H), 7.79 (s, 4H), 7.44 (s, 8H), 7.21 (d, J = 31.2 Hz, 16H), 6.47 (s, 2H), 6.24 (s, 2H), 2.69 (s, 1H), 2.25 (s, 3H), 0.99 (s, 6H).13C nmr (150 MHz, D6-DMSO), δ (PPM) 158.03, 147.81, 13.57, 136.68, 130.34, 130.02, 128.68, 128.01, 125.51, 124.45, 120.81, 103.49, 103.49 , 103. , 86.52, 84.75, 63.29, 30.90, 22.29, 18.83.ESI-MS: m/z [M-Cl]+ = 1097,25.
Senteza 4,7-bis[4-(N,N-diethylamino)fenyl-5,6-diamino-2,1,3-benzothiadiazole (L2): L2 di du gavan de hate sentez kirin.Pd(PPh3)4 (46 mg, 0.040 mmol) li N,N-diethyl-4-(tributylstannyl)aniline (1.05 g, 2.4 mmol) û çareseriya 4,7-dibromo-5,6-dinitro hate zêdekirin - 2, 1,3-benzothiadiazole (0,38 g, 1,0 mmol) di toluene hişk (100 ml).Tevlîhev 24 saetan di 100°C de hat hildan.Piştî rakirina toluene di valahiyê de, qalikê encam bi ethera neftê hate şûştin.Dûv re tevliheviyek ji vê pêkhateyê (234,0 mg, 0,45 mmol) û toza hesin (0,30 g, 5,4 mmol) di asîdê acetîk (20 ml) de 4 saetan di germahiya 80 ° C de hate hildan.Tevliheva reaksiyonê di avê de hate rijandin û qalika qehweyî ya ku derketibû bi parzûnê hate berhev kirin.Hilber bi sublimasyona valahiya du caran hate paqij kirin da ku hişkek kesk bide (126.2 mg, 57% berberî).qûn.Ji bo C26H32N6S tê hesibandin: C 67.79, H 7.00, N 18.24.Hat dîtin: C 67,84, H 6,95, H 18,16.1H NMR (600 MHz, CDCl3), δ (ppm) 7.42 (d, 4H), 6.84 (d, 4H), 4.09 (s, 4H), 3.42 (d, 8H), 1.22 (s, 12H).13С NMR (150 MHz, CDCl3), δ (ppm) 151.77, 147.39, 138.07, 131.20, 121.09, 113.84, 111.90, 44.34, 12.77.ESI-MS: m/z [M+H]+ = 461,24.
Li jêr prosedurên mîna RuDA pêkhatî hatin amadekirin û paqij kirin.qûn.Ji bo C48H48Cl2N8RuS tê hesabkirin: C 61.27, H 5.14, N 11.91.Hat dîtin: C, 61.32, H, 5.12, N, 11.81, 1H NMR (600 MHz, d6-DMSO), δ (ppm) 10.19 (s, 2H), 9.28 (s, 2H), 8.09 (s, 2H), 7.95 (s, 4H), 6.93 (s, 4H), 6.48 (d, 2H), 6.34 (s, 2H), 3.54 (t, 8H), 2.80 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 1.31 (t, 12H), 1.07 (s, 6H).13C NMR (151 MHz, CDCL3), δ (PPM) 158.20, 153.59, 1385, 138.71, 130.44, 128.87, 128.35, 121.70, 111.84, 110.76, 105.07, 104.23, 87.0, 84.4., 38.06, 31.22, 29.69, 22.29, 19.19, 14.98, 12.93.ESI-MS: m/z [M-Cl]+ = 905,24.
RuDA di MeOH/H2O (5/95, v/v) de bi giraniya 10 μM hat hilweşandin.Spektroma vegirtinê ya RuDA her 5 hûrdeman li ser spektrofotometerek Shimadzu UV-3600 di bin tîrêjê de bi ronahiya lazerê bi dirêjahiya pêlê 808 nm (0,5 W/cm2) hate pîvandin.Spektrên ICG di bin şert û mercên standard de hatine tomar kirin.
Spektrên EPR li ser spektrometerek Bruker EMXmicro-6/1 bi hêzek mîkropêla 20 mW, rêzek şopandinê 100 G û modulasyona zeviyê 1 G hatine tomar kirin. 2,2,6,6-tetramethyl-4-piperidone. (TEMP) û 5,5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide (DMPO) wekî xefikên spin têne bikar anîn.Spektrên rezonansê yên elektronîkî ji bo çareseriyên tevlihev ên RuDA (50 µM) û TEMF (20 mM) an DMPO (20 mM) di bin çalakiya tîrêjiya lazerê de bi dirêjahiya pêlê 808 nm (0,5 W / cm2) hatine tomar kirin.
Hesabên DFT û TD-DFT ji bo RuDA bi karanîna bernameya Gaussian 1666,67,68 di asta PBE1PBE/6–31 G*//LanL2DZ de di çareseriya avî de hatin kirin.HOMO-LUMO, qul û belavkirina elektronên yekaliya kêm-enerjiya dewleta heyecan RuDA bi karanîna bernameya GaussView (guhertoya 5.0) hate xêz kirin.
Me pêşî hewl da ku bi karanîna spektroskopiya dîtbar a UV-ya kevneşopî ya bi ICG (ΦΔ = 0.002) wekî standardek bikêra hilberîna 1O2 RuDA bipîve, lê hilweşandina wêneya ICG bi tundî bandor li ser encaman kir.Bi vî rengî, hilberîna kuantûmê ya 1O2 RuDA bi tespîtkirina guherînek di tundiya floransê ya ABDA de bi qasî 428 nm dema ku bi lazerek bi dirêjahiya pêlê 808 nm (0,5 W/cm2) tê tîrêjkirin hate pîvandin.Ceribandinên li ser RuDA û RuDA NPs (20 μM) di nav avê/DMF (98/2, v/v) de ku ABDA (50 μM) heye hatin kirin.Berhema kuantûmê ya 1O2 bi formula jêrîn hate hesibandin: ΦΔ (PS) = ΦΔ (ICG) × (rFS / APS) / (rICG / AICG).rPS û rICG rêjeyên reaksiyonê yên ABDA ne ku bi 1O2 re, bi rêzê, ji fotosensîbilker û ICG têne wergirtin.APS û AICG bi rêzdarî bi rêzdarî 808 nm vegirtina hestiyarker û ICG ne.
Pîvandinên AFM di şert û mercên şil de bi karanîna moda şopandinê li ser pergalek Bruker Dimension Icon AFM hatin kirin.Bi karanîna avahiyek vekirî ya bi hucreyên şil re, hucre du caran bi etanolê hatin şûştin û bi tîrêjek nîtrojenê hatin zuha kirin.Hucreyên hişkkirî têxin serê optîkî ya mîkroskopê.Tavilê dilopek ji nimûneyê bixin nav hewza şilekê û bi şirincek plastîk a yekcar sterîl û derziyek sterîl bixin ser kantê.Dilopek din rasterast li ser nimûneyê tê danîn, û dema ku serê optîkî tê xwarê, her du dilop li hev dikevin, di navbera nimûne û depoya şilê de meniscusek çê dikin.Pîvandinên AFM-ê bi karanîna kantek nîtrîdê ya bi şiklê SCANASYST-FLUID (Bruker, hişkahî k = 0,7 N m-1, f0 = 120-180 kHz) hatin kirin.
Kromatogramên HPLC li ser pergalek Waters e2695 ku bi stûnek phoenix C18 (250 × 4.6 mm, 5 μm) ve hatî çêkirin, bi karanîna detektorek UV/Vis 2489 ve hatî girtin.Dirêjahiya pêla dedektorê 650 nm e.Qonaxên mobîl A û B bi rêzê av û metanol bûn, û rêjeya herikîna qonaxa mobîl 1.0 ml · min-1 bû.Pîvana (solvent B) wiha bû: 100% ji 0 heta 4 hûrdem, 100% heta 50% ji 5 heta 30 hûrdem, û ji 31 heta 40 hûrdeman ji 100% vedigere.Ore di nav çareseriyek tevlihev a metanol û avê de (50/50, ji hêla volume) ve bi giraniya 50 μM hate hilweşandin.Hêjmara derzîlêdanê 20 μl bû.
Nirxên GPC li ser amûrek Thermo ULTIMATE 3000 ku bi du stûnên PL aquagel-OH MIXED-H (2×300×7.5 mm, 8 μm) û detektorek nîşana refraksiyonê ya ERC RefratoMax520 ve hatî tomar kirin.Stûna GPC bi leza herikîna 1 ml/min di 30°C de bi avê hate şuştin.Ore NPs di çareseriya PBS de (pH = 7.4, 50 μM) hatin hilweşandin, qebareya derzîlêdanê 20 μL bû.
Wêneyên wêneyan li ser sazûmanek elektrokîmyayî (CHI-660B, Chinaîn) hatin pîvandin.Bersivên optoelektronîkî dema ku lazer hate vemirandin û girtin (808 nm, 0,5 W / cm2) bi rêzê ve bi voltaja 0,5 V di qutiyek reş de hate pîvandin.Hucreyek sê-elektrodî ya standard bi elektrodek karbonê ya camî ya bi teşe L-ê (GCE) wekî elektrodek xebitandinê, elektrodek calomel standard (SCE) wekî elektrodek referansê, û dîskek platîn wekî elektrodek dijber hate bikar anîn.Wek elektrolît çareseriyek 0,1 M Na2SO4 hate bikar anîn.
Rêza hucreya kansera pêsîrê ya mirovî MDA-MB-231 ji KeyGEN Biotec Co., LTD (Nanjing, Chinaîn, hejmara katalogê: KG033) hate kirîn.Hucreyên di yekrengan de li Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM, glîkoza bilind) ku bi çareseriyek ji %10 seruma fetal bovine (FBS), penîsîlîn (100 μg/ml) û streptomycin (100 μg/ml) lê tê mezin kirin.Hemî şaneyên di 37°C de di atmosferek şil ku %5 CO2 tê de tê de hatin çandin.
Assay MTT hate bikar anîn da ku cytotoxicity ya RuDA û RuDA-NPs di hebûn û nebûna tîrêjên ronahiyê de, bi Vc (0.5 mM) an bêyî wê, were bikar anîn.Hucreyên penceşêrê MDA-MB-231 di lewheyên 96-kaniyê de bi dendika şaneyê ya bi qasî 1 x 105 şan/ml/kanî hatin mezin kirin û 12 saetan li 37.0°C di atmosferek ji %5 CO2 û %95 hewayê de hatin inkubakirin.RuDA û RuDA NPsên ku di avê de hatin helandin li şaneyan hatin zêdekirin.Piştî 12 saetên înkubasyonê, şaneyên bi dirêjahiya pêla 808 nm 10 deqeyan (300 J cm -2) li ber tîrêjên lazerê yên 0,5 W cm -2 hatin rûxandin û paşê 24 saetan di tariyê de man.Dûv re şaneyên bi MTT (5 mg/ml) 5 saetên din hatin inkubakirin.Di dawiyê de, navgînê biguherînin DMSO (200 µl) da ku krîstalên formazan ên binefşî yên ku di encamê de têne hilweşandin.Nirxên OD-ê bi karanîna xwendevanek mîkrok bi dirêjahiya pêlê 570/630 nm hatin pîvan.Nirxa IC50 ji bo her nimûneyê bi karanîna nermalava SPSS-ê ji kelûpelên doz-bersiv ên ku bi kêmî ve sê ceribandinên serbixwe hatine wergirtin hate hesibandin.
Hucreyên MDA-MB-231 bi RuDA û RuDA-NP bi giraniya 50 μM hatin derman kirin.Piştî 12 saetên înkubasyonê, şaneyên bi lazerek bi dirêjahiya pêlê 808 nm û hêza 0,5 W/cm2 ji bo 10 deqîqeyan (300 J/cm2) hatin tîrêjkirin.Di koma vîtamîna C (Vc) de, hucre bi 0,5 mM Vc berî tîrêjkirina lazerê hatin derman kirin.Dûv re şaneyên 24 saetên din di tariyê de hatin inkubasyon, dûv re 30 hûrdem bi calcein AM û propidium iodide (20 μg/ml, 5 μl) hatin boyaxkirin, piştre bi PBS (10 μl, pH 7,4) hatin şûştin.wêneyên hucreyên rengkirî.
Dema şandinê: Sep-23-2022
